食品微生物霉菌和酵母菌计数检验标准操作程序

1 霉菌

1.1 试剂:马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基,附加抗菌素、孟加拉红培养基、灭菌蒸馏水

1.2 仪器:冰箱、恒温培养箱、均质器、恒温振荡器、显微镜、天平、无菌锥形瓶、

无菌广口瓶、无菌吸管、无菌平皿、无菌试管、无菌牛皮纸袋、塑料袋

1.3 检验程序

食品微生物霉菌和酵母菌计数检验标准操作程序-八彩历史

1.4 操作:

1.4.1样品的稀释

1.4.1.1 固体和半固体样品:称取25g样品至盛有225ml灭菌蒸馏水的锥形瓶中,充分振摇,即为1:10的稀释液。或放入盛有225ml无菌蒸馏水的均质袋中,用拍击式均质器拍打2分钟,制成1:10的样品匀液。

1.4.1.2液体样品:以无菌吸管吸取25ml样品至盛有225ml无菌蒸馏水的锥形瓶(可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10的样品匀液。

1.4.1.3 取1 ml 1:10稀释液注入含有9 ml无菌水的试管中,另换一支1 ml无菌吸

管反复吹吸,此液为1:100稀释级。

1.4.1.4 按上述操作顺序制备10倍系列稀释样品匀液,每递增稀释一次,换用一支

1ml无菌吸管,

1.4.1.5  根据对样品污染情况的估计,选择2-3个适宜稀释度的样品匀液,在进行10倍递增稀释的同时,每个稀释度分别吸取1ml样品匀液于2个无菌平皿内,同时分别取1ml样品稀释液加入2个无菌平皿人空白对照。

1.4.1.6  及时将15-20ml冷却至46℃的马铃薯-葡萄糖-琼脂或孟加拉红培养基(可放置于46±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平思虑使其混合均匀。

1.4.2培养

1.4.2.1 待琼脂凝固后,倒置于28±1℃温箱培养5天,观察并记录。

1.4.3菌落计数

1.4.3.1肉跟观察,必要时可用放大镜,记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母菌。以菌落形成单位CFU表示。

1.4.3.2 选取菌落数在10-150CFU的平板,根据菌落形态分别计数霉菌笔酵母数。霉菌蔓延生长覆盖整个平板的可记录为多不可计。菌落数应采用两个平板的平均数。

1.4.4结果与报告

1.4.4.1 计算两个平板菌落数和平均值,再将平均值乘以稀释倍数计算。

1.4.4.1.1 若所有平板上菌落数均大于150CFU  ,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。

1.4.4.1.2 若所有平板上菌落数均小于10CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。

1.4.4.1.3 若所有稀释度平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算;如为原液,则以小于1计数。

1.4.4.2 报告

1.4.4.2.1  菌落数在100以内时,按“四舍五入”原则修约,采用两位有效数字报告。

1.4.4.2.2 菌落数大于或等于100时,前3位数字采用“四舍五入”原则修约后,取前两位数字,后面用0代替位数来表示结果;也可用10的指数形式来表示,此时也按“四舍五入”原则修约,采用两位有效数字。

1.4.4.2.3  称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/ml为单位报告,报告或分别报告霉菌和/或酵母数。